我國(guó)對(duì)哪些動(dòng)物疫病實(shí)施強(qiáng)制免疫

具體內(nèi)容到農(nóng)業(yè)部網(wǎng)站上2015年水南街道動(dòng)e78988e69d物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃 一、總體要求 對(duì)高致病性禽流感、口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟等4種動(dòng)物疫病實(shí)行強(qiáng)制免疫，群體免疫密度常年維持在90%以上，其中應(yīng)免畜禽免疫密度要達(dá)到100%，免疫抗體合格率全年保持在70%以上。二、職責(zé)分工各村居對(duì)轄區(qū)內(nèi)動(dòng)物防疫工作負(fù)總責(zé)，組織有關(guān)部門按照職責(zé)分工，落實(shí)強(qiáng)制免疫計(jì)劃，保證免疫密度。各村居具體組織實(shí)施強(qiáng)制免疫計(jì)劃，落實(shí)動(dòng)物強(qiáng)制免疫質(zhì)量提升行動(dòng)計(jì)劃，街道制定并執(zhí)行本轄區(qū)強(qiáng)制免疫計(jì)劃實(shí)施方案，負(fù)責(zé)強(qiáng)制免疫動(dòng)物疫病疫苗的供應(yīng)、保存和使用監(jiān)管。飼養(yǎng)動(dòng)物的單位和個(gè)人應(yīng)當(dāng)依法履行強(qiáng)制免疫義務(wù)，按照獸醫(yī)主管部門的要求做好免疫工作。對(duì)規(guī)模養(yǎng)殖的動(dòng)物實(shí)施程序化免疫，對(duì)散養(yǎng)的動(dòng)物實(shí)施集中免疫和定期補(bǔ)免。三、組織實(shí)施（一）加強(qiáng)組織部署，確保免疫密度。各村居要按照本計(jì)劃要求，結(jié)合本地實(shí)際，及時(shí)落實(shí)強(qiáng)制免疫計(jì)劃實(shí)施方案，認(rèn)真組織部署強(qiáng)制免疫工作。繼續(xù)堅(jiān)持散養(yǎng)畜禽實(shí)行集中免疫和“月免疫日”相結(jié)合，規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)按程序規(guī)范免疫的做法，確保免疫全覆蓋。（二）加強(qiáng)業(yè)務(wù)培訓(xùn)，提升免疫質(zhì)量。各村居要按照“逐級(jí)負(fù)責(zé)，分級(jí)培訓(xùn)”的原則開(kāi)展動(dòng)物防疫技術(shù)培訓(xùn)，特別要組織做好村居動(dòng)物防疫員的免疫技術(shù)培訓(xùn)。在實(shí)施免疫時(shí)要規(guī)范操作，按要求更換注射針頭，做好各項(xiàng)消毒工作，防止在免疫操作中人為傳播疫病。要加強(qiáng)疫苗的運(yùn)輸和保存管理，保證疫苗質(zhì)量。（三）加強(qiáng)一線指導(dǎo)，規(guī)范免疫管理。繼續(xù)推行“一線工作法”，切實(shí)加強(qiáng)對(duì)一線動(dòng)物防疫工作的指導(dǎo)和服務(wù)。要進(jìn)村入場(chǎng)入戶加強(qiáng)對(duì)免疫工作的跟蹤和督導(dǎo)。組建免疫專業(yè)隊(duì)，開(kāi)展“拉網(wǎng)式”集中免疫。要規(guī)范做好免疫信息記錄、報(bào)送和免疫檔案保管工作，及時(shí)反饋免疫過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題。要切實(shí)加強(qiáng)對(duì)規(guī)模場(chǎng)強(qiáng)制免疫工作的監(jiān)管。 四、疫苗監(jiān)管 （一）強(qiáng)化疫苗供應(yīng)管理。強(qiáng)制免疫疫苗由省農(nóng)業(yè)廳依法進(jìn)行統(tǒng)一招標(biāo)采購(gòu)，實(shí)行省—設(shè)區(qū)市—縣（市、區(qū)）—鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）—村（規(guī)模場(chǎng)）五級(jí)逐級(jí)發(fā)放制度，原則上不得越級(jí)發(fā)放。街道要進(jìn)一步規(guī)范疫苗供應(yīng)工作，建立健全疫苗供應(yīng)記錄檔案；要對(duì)疫苗的保存、運(yùn)輸、使用等環(huán)節(jié)冷鏈體系運(yùn)行情況進(jìn)行監(jiān)管，確保疫苗質(zhì)量的穩(wěn)定，防止疫苗浪費(fèi)。嚴(yán)禁任何單位和個(gè)人倒買倒賣國(guó)家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫疫苗。 （二）規(guī)范疫苗自購(gòu)行為。各村居要嚴(yán)格執(zhí)行畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)自購(gòu)強(qiáng)制免疫疫苗的備案制度。養(yǎng)殖場(chǎng)自購(gòu)強(qiáng)制免疫疫苗所需經(jīng)費(fèi)自行承擔(dān)，疫苗只限于本養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)飼養(yǎng)的畜禽免疫用。各村居動(dòng)物防疫員要加強(qiáng)對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)的疫苗采購(gòu)和使用情況的監(jiān)管，嚴(yán)禁養(yǎng)殖場(chǎng)以技術(shù)服務(wù)、推廣、代銷、代購(gòu)、轉(zhuǎn)讓等名義進(jìn)行變相銷售或經(jīng)營(yíng)強(qiáng)制免疫疫苗的行為。 （三）及時(shí)處理好動(dòng)物免疫應(yīng)激反應(yīng)。動(dòng)物強(qiáng)制免疫出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)的，要立即采取緊急救治措施，盡可能減少農(nóng)戶損失。出現(xiàn)大規(guī)模應(yīng)激反應(yīng)的，應(yīng)在12小時(shí)內(nèi)報(bào)至延平區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心。對(duì)因強(qiáng)制免疫應(yīng)激死亡的畜禽，畜牧獸醫(yī)站要按規(guī)定及時(shí)派員到現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行認(rèn)定，嚴(yán)格執(zhí)行接到報(bào)告后12小時(shí)內(nèi)認(rèn)定和分級(jí)認(rèn)定規(guī)定，并規(guī)范做好認(rèn)定記錄和補(bǔ)償經(jīng)費(fèi)申請(qǐng)工作。 五、監(jiān)督檢查 （一）落實(shí)免疫責(zé)任。針對(duì)免疫工作，逐個(gè)環(huán)節(jié)細(xì)化責(zé)任，層層落實(shí)到人。對(duì)因免疫不到位引發(fā)動(dòng)物疫情的，要嚴(yán)肅追究相關(guān)人員責(zé)任。對(duì)不履行強(qiáng)制免疫職責(zé)的單位和個(gè)人，要依法追究其責(zé)任。（二）加強(qiáng)免疫效果檢查。街道要按照《動(dòng)物強(qiáng)制免疫質(zhì)量提升行動(dòng)計(jì)劃》的要求，切實(shí)加強(qiáng)免疫效果監(jiān)測(cè)，定期組織免疫效果自查與評(píng)價(jià)工作，對(duì)被抽檢的場(chǎng)、公司，村居存欄家畜（禽）群體抗體合格率未達(dá)到規(guī)定要求的，盡快進(jìn)行補(bǔ)免。（三）加強(qiáng)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)管。畜牧獸醫(yī)站出具檢疫證明時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格核查調(diào)運(yùn)畜禽的免疫情況，對(duì)調(diào)出縣境的種畜禽或其他非屠宰畜禽，在調(diào)運(yùn)前2周進(jìn)行一次加強(qiáng)免疫，對(duì)調(diào)運(yùn)的種蛋和未達(dá)首免日齡的仔畜、雛禽，應(yīng)標(biāo)明其供體的免疫情況，未加強(qiáng)免疫或免疫情況不明的禁止調(diào)運(yùn)。（四）加大督促檢查力度。各村居要及時(shí)掌握本轄區(qū)的免疫工作進(jìn)展，加大自查指導(dǎo)力度，定期對(duì)強(qiáng)制免疫計(jì)劃落實(shí)情況進(jìn)行督促檢查，并對(duì)檢查結(jié)果進(jìn)行通報(bào)，確保免疫工作落實(shí)到位。（五）強(qiáng)化績(jī)效考核。要進(jìn)一步加強(qiáng)重大動(dòng)物疫病防控延伸績(jī)效管理，健全防控獎(jiǎng)懲機(jī)制，落實(shí)防控工作責(zé)任，推進(jìn)強(qiáng)制免疫工作落實(shí)到位。（六）做好免疫失敗的處理。街道對(duì)轄區(qū)內(nèi)免疫抗體水平不達(dá)標(biāo)情況和動(dòng)物強(qiáng)制免疫失敗情況進(jìn)行調(diào)查處理，認(rèn)真分析原因，及時(shí)改進(jìn)，并將有關(guān)情況及時(shí)報(bào)延平區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心。 六、其他 （一）各村居在做好動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫工作的同時(shí)，要統(tǒng)籌做好新城疫、狂犬病、豬流行性乙型腦炎等其他動(dòng)物疫病的免疫工作。 （二）若國(guó)家、省、市、區(qū)動(dòng)物強(qiáng)制免疫政策發(fā)生變動(dòng)，街道將根據(jù)國(guó)家、省、市、區(qū)的要求和水南實(shí)際，另行調(diào)整本計(jì)劃。 附件：1.高致病性禽流感免疫方案 2.口蹄疫免疫方案 3.高致病性豬藍(lán)耳病免疫方案 4.豬瘟免疫方案

單克隆抗體制備的基本原理與過(guò)程？有什么意義？

哈哈~我們剛考到這題

原理：

B淋巴細(xì)胞在抗原的刺激下，能夠分化、增殖形成具有針對(duì)這種抗原分泌特異性抗體的能力。B細(xì)胞的這種能力和量是有限的，不可能持續(xù)分化增殖下去，因此產(chǎn)生免疫球蛋白的能力也是極其微小的。將這種B細(xì)胞與非分泌型的骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，再進(jìn)一步克隆化，這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞是既具有瘤的無(wú)限生長(zhǎng)的能力，又具有產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞的能力，將這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)或注入小鼠體內(nèi)即可獲得大量的高效價(jià)、單一的特異性抗體。這種技術(shù)即稱為單克隆抗體技術(shù)。

過(guò)程

1）免疫脾細(xì)胞的制備 制備單克隆抗體的動(dòng)物多采用純系 Balb/c小鼠。免疫的方法取決于所用抗原的性質(zhì)。免疫方法同一般血清的制備，也可采用脾內(nèi)直接免疫法。

2）骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)與篩選 在融合前，骨髓瘤細(xì)胞應(yīng)經(jīng)過(guò)含8-AG的培養(yǎng)基篩選，防止細(xì)胞發(fā)生突變恢復(fù)HGPRT的活性（恢復(fù)HGPRT的活性的細(xì)胞不能在含8-AG的培養(yǎng)基中存活）。骨髓瘤細(xì)胞用10%小牛血清的培養(yǎng)液在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，融合前24h換液一次，使骨髓瘤細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。

3）細(xì)胞融合的關(guān)鍵:

1技術(shù)上的誤差常常導(dǎo)致融合的失敗。例如，供者淋巴細(xì)胞沒(méi)有查到免疫應(yīng)答。這必然要失敗的。

2融合試驗(yàn)最大的失敗原因是污染，融合成功的關(guān)鍵是提供一個(gè)干凈的環(huán)境，以及適宜的無(wú)菌操作技術(shù)。

4）陽(yáng)性克隆的篩選 應(yīng)盡早進(jìn)行。通常在融合后10天作第一次檢測(cè)，過(guò)早容易出現(xiàn)假陽(yáng)性。檢測(cè)方法應(yīng)靈敏、準(zhǔn)確、而且簡(jiǎn)便快速。具體應(yīng)用的方法應(yīng)根據(jù)抗原的性質(zhì)，以及所需單克隆抗體的功能進(jìn)行選擇。常用的方法有 RIA法、 ELISA法和免疫熒光法等。其中ELISA法最簡(jiǎn)便，RIA法最準(zhǔn)確。陽(yáng)性克隆的篩選應(yīng)進(jìn)行多次，均陽(yáng)性時(shí)才確定為陽(yáng)性克隆進(jìn)行擴(kuò)增。

5）克隆化 克隆化的目的是為了獲得單一細(xì)胞系的群體?？寺』瘧?yīng)盡早進(jìn)行并反復(fù)篩選。這是因?yàn)槌跗诘碾s交瘤細(xì)胞是不穩(wěn)定的，有丟失染色體的傾向。反復(fù)克隆化后可獲得穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞株?？寺』姆椒ê芏啵畛Ｓ玫氖怯邢尴♂尫?。

（1）顯微操作法：在顯微鏡下取單細(xì)胞，然后進(jìn)行單細(xì)胞培養(yǎng)。這種方法操作復(fù)雜，效率低，故不常用。

（2）有限稀釋法：將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的雜交瘤細(xì)胞用培養(yǎng)液作一定的稀釋后，按每孔1個(gè)細(xì)胞接種在培養(yǎng)皿中，細(xì)胞增值后成為單克隆細(xì)胞系。第一次克隆化時(shí)加一定量的飼養(yǎng)細(xì)胞。由于第一次克隆化生長(zhǎng)的細(xì)胞不能保證單克隆化，所以為獲得穩(wěn)定的單克隆細(xì)胞株需經(jīng)2～3次的再克隆才成。應(yīng)該注意的是，每次克隆化過(guò)程中所有有意義的細(xì)胞都應(yīng)冷凍保存，以便重復(fù)檢查，避免丟失有意義的細(xì)胞。

（3）軟瓊脂法：將雜交瘤細(xì)胞稀釋到一定密度，然后與瓊脂混懸。在瓊脂中的細(xì)胞不能自由移動(dòng)，彼此互不相混，從而達(dá)到單細(xì)胞培養(yǎng)的目的。但此法不如有限稀釋法好。

（4）熒光激光細(xì)胞分類法：用抗原包被的熒光乳膠微球標(biāo)記雜交瘤細(xì)胞，然后根據(jù)抗原與雜交瘤細(xì)胞結(jié)合的特異性選出細(xì)胞，并進(jìn)行單細(xì)胞培養(yǎng)。

6）細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇

7）大規(guī)模單克隆抗體的制備 選出的陽(yáng)性細(xì)胞株應(yīng)及早進(jìn)行抗體制備，因?yàn)槿诤霞?xì)胞隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，發(fā)生污染、染包體丟失和細(xì)胞死亡的機(jī)率增加。抗體制備有兩種方法。一是增量培養(yǎng)法，即將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)，在培養(yǎng)液中分離單克隆抗體。該法需用特殊的儀器設(shè)備，一般應(yīng)用無(wú)血清培養(yǎng)基，以利于單克隆抗體的濃縮和純化。最普遍采用的是小鼠腹腔接種法。選用BALB/c小鼠或其親代小鼠，先用降植烷或液體石蠟行小鼠腹腔注射，一周后將雜交瘤細(xì)胞接種到小鼠腹腔中去。通常在接種一周后即有明顯的腹水產(chǎn)生，每只小鼠可收集5～10ml的腹水，有時(shí)甚至超過(guò)40ml。該法制備的腹水抗體含量高，每毫升可達(dá)數(shù)毫克甚至數(shù)十毫克水平。此外，腹水中的雜蛋白也較少，便于抗體的純化。

意義：

用于以下各種生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)并具有醫(yī)用價(jià)值

（1）沉淀反應(yīng)：Precipitation reaction

（2）凝集實(shí)驗(yàn)：haemaglutination

（3）放射免疫學(xué)方法檢測(cè)免疫復(fù)合物

（4） 流式細(xì)胞儀：用于細(xì)胞的分型和細(xì)胞分離。

（5）ELISA 等免疫學(xué)檢測(cè)

（6）BIAcore biosensor:檢測(cè)Ab-Ag或與蛋白的

親和力 。

(7) 免疫印記（western blotting)

（8） 免疫沉淀：

（9） 親和層析：分離蛋白質(zhì)

（10） 磁珠分離細(xì)胞

（11）臨床疾病的診斷和治療；